Nitro Selüloz ve PVDF Arasındaki Fark | Nitro selüloz vs PVDF

Anahtar Farkı - Nitro Selüloz vs PVDF

Western blotlama, bir protein örneğinden spesifik proteinlerin tespiti ve miktarının belirlenmesine izin veren bir yöntemdir. Tekniğin güvenilirliği, proteinlerin jelden emilmesi için doğru bir zarın seçilmesine bağlıdır. Farklı tipte mikro gözenekli zarlar vardır. Nitroselüloz ve PVDF membranları, diğer zar türlerine göre özel nitelikleri nedeniyle araştırmacılar tarafından tercih edilen iki membrandır. Nitroselüloz veya PVDF arasındaki seçim de batı lekelemesinde bir diğer zorluktur. Hem nitroselüloz hem de PVDF, yüksek bir protein absorpsiyon kapasitesine sahiptir. Nitroselüloz ve PVDF membranı arasındaki en önemli fark, nitroselüloz membranların, antikorları soymak ve antikor reproblama için membranı tekrar kullanma kabiliyeti yokken, PVDF membranları soyma ve tekrar kullanma kabiliyeti olan olmasıdır.

İÇİNDEKİLER

1. Genel ve Anahtar Farkı

2. Nitro selüloz nedir

3. PVDF nedir

4. Yan yana karşılaştırma - Nitro selüloz vs PVDF

5. Özet

Nitro Selüloz Nedir?

Nitro selüloz, selülozun nitrik asit ile işlenmesiyle üretilen bir polimerdir ve moleküler biyolojide, özellikle güney, kuzey ve batı blotlama gibi lekelenme tekniklerinde mikro gözenekli membranlar yapmak için kullanılır. Nitroselüloz membranların gözenek boyutları 3 ila 20 μm arasında değişir. Nitroselüloz mikro gözenekli membranlar membranın yüzeyinde meydana gelen immünokimyasal reaksiyonun saptanmasını kolaylaştırır. Bu nedenle, nitroselüloz membranlar, proteinlerin immobilizasyonu ve belirli proteinlerin saptanması için batı lekeleme işleminde sıklıkla kullanılmaktadır. Nitroselüloz membranlar ayrıca glikoproteinleri ve nükleik asitleri de hareketsiz kılabilir.

Nitroselüloz zarlar, çeşitli özelliklere bağlı olarak yanal akış deneylerinde tercih edilir. Nitrocelluloz membranlar proteinleri yüksek konsantrasyonda emer. Zarın ıslatılması için kullanılan çözücü, nitroselüloz membran protein emilimini azaltmaz. Nitroselüloz zarlar istenilen jel boyutuna kolayca kesilebilir ve proteinleri jelden membrana elektrik veya kılcal transfer yoluyla aktarabilir. Nitro selüloz yüksek bağlama potansiyeline sahip zar yoluyla proteinlerin daha hızlı akmasını sağlar. Nitro selüloz daha iyi bir taşıma gücü gösterir. Nitroselüloz zarının diğer bir özel özelliği, çeşitli plastik desteklere solvent içermeyen suya dayanıklı yapıştırıcılarla kolaylıkla yapıştırılabilmesidir.

Şekil 01: Western blot için nitroselüloz membran

PVDF nedir? Poliviniliden difluorür (PVDF), viniliden difluorür polimerizasyonu ile üretilen floropolimerdir ve proteinlerin yüksek immobilizasyon kabiliyetine sahiptir. Bu nedenle, PVDF'den yapılmış mikrogözenekli membranlar protein karışımlarından spesifik proteinleri analiz etmek için batı lekeleme tekniklerinde kullanılır. PVDF zarları ayrıca amino asit analizi ve protein dizilimi için de kullanılabilir. PVDF membranının nitroselüloz membran üzerindeki en önemli özelliği, antikorlardan kolaylıkla soyulması ve sonraki antikor probları için yeniden kullanılmasıdır.

PVDF zarları nitroselüloz membranlardan daha kalın; dolayısıyla, yeniden kullanım esnasında hasarlara karşı daha dayanıklıdır. PVDF membranları oldukça hidrofobiktir. Bu nedenle, kullanımdan önce metanol veya izopropanol ile ıslatılmalıdır.

Nitroselüloz ve PVDF arasındaki fark nedir?

- diff Makale Tablo ->

Nitrocelluloz vs PVDF 'dan Önce Orta> Nitro selüloz, selülozdan oluşan bir polimerdir.

PVDF, viniliden difluorür polimerizasyonu ile üretilen bir floropolimerdir.
Membran Gözenek Boyutu	Tipik gözenek boyutları 0,1, 0,2 veya 0,45μ
Tipik gözenek boyutları 0,1, 0,2 veya 0,45 um
Protein Bağlama Kapasitesi Nitro selüloz, 80 ila 100 ug / cm	2
protein bağlama kapasitesine sahiptir.
PVDF'nin protein bağlama kapasitesi 170 ila 200 μg / cm2 9992 9999 arasındadır. Duyarlılık Bu, PVDF'ye kıyasla düşük bir hassasiyete sahiptir.	Bu, yüksek bir hassasiyete sahiptir. Düşük Dereceli Proteinlerin Saptanması Nitroselüloz membranlardaki duyarlılık düşük olduğundan, az miktarda eksprese edilen proteinlerin tespiti için uygun değildir.
Bu, yüksek duyarlılığından ötürü düşük derecede eksprese proteinlerin saptanması için daha uygundur.
Arka Plan Gürültüsü	Bu, düşük arka plan gürültüsüne sahiptir
Bu, daha yüksek arka plan gürültüsüne sahiptir.
Proteinler ile Etkileşim	Protein molekülleri hidrofobik etkileşimler yoluyla nitroselüloz membranlara bağlanır.
Proteinler, hidrofobik ve dipole etkileşimler yoluyla PVDF zarlarına bağlanır.
Membranın Doğası	Nitro selüloz gevrek ve kırılgandır. Bununla birlikte, nitroselülozun versiyonları mevcuttur ve dirençlidir.
PVDF daha dayanıklıdır ve daha yüksek kimyasal dirence sahiptir.
Şerit ve Yeniden Kullanma Yeteneği	Nitro selüloz, sinyali kaybetmeden sıyırma ve yeniden sıkma konusunda zorluk çekebilir.
PVDF, reproblama ve sıralama uygulamaları için idealdir.
Uygunluk	Nitro selüloz düşük molekül ağırlıklı proteinlerin tespiti için idealdir.
PVDF, daha yüksek molekül ağırlıklı proteinlerin bulunması için daha uygundur.
Diğer Kullanım Alanları	Nitro selüloz, nükleik asit analizi ve nokta / slot blotlama için kullanılabilir.
PVDF, protein dizilimi ve katı faz analiz sistemleri için kullanılabilir.
Maliyet	Bu PVDF membranlardan daha ucuzdur.
Bu, nitroselüloz zarlardan daha pahalıdır.
Ön Islatma Gerekliliği	Nitrocellüloz zarlar, metanol ile ön temizleme gerektirmez.
PVDF zarları metanol ile pres önlemeyi gerektirir.
Özet - Nitro-selüloz vs PVDF	Nitroselüloz membranlar, lateral akış tahlili için ticari olarak kullanılan ilk zarlardır. Proteinleri emme kapasitesi yüksektir. Bu nedenle, nitroselüloz membranlar batı lekelemesinde kullanılır. PVDF, batı lekelemesinde kullanılan başka bir membrandır ve yüksek bir protein emme kapasitesine de sahiptir. Her iki tip de protein analizi için batı lekelemesinde kullanılır. Bununla birlikte, PVDF membranları, batı lekeleme için nitroselüloz zarlardan daha uygun hale getiren daha özel niteliklere sahiptir. Ancak nitroselüloz zarlar düşük moleküler ağırlıklı proteinlerin tespiti için daha uygundurlar, PVDF zarları yüksek moleküler ağırlıklı proteinlerin tespiti için daha uygundur. Bu, nitroselüloz ve PVDF membranları arasındaki farktır.
Resim Nezami:
1. "Western blot aktarımı" Bensaccount tarafından İngilizce Wikipedia'da (CC BY 3. 0) Commons Wikimedia'da	Kaynak:

1 ile. Luque-Garcia, Jose L., Ge Zhou, Tung-Tien Sun ve Thomas A. Neubert. "Matris Destekli Lazer Desorpsiyon / İyonlaştırma Kütle Spektrometresi ile Protein Karakterizasyonu için Nitroselüloz Membranların Kullanımı. " Analitik Kimya. Ulusal Tıp Kütüphanesi, 15 Temmuz 2006. Web. 28 Mart 2017

2. "Moleküler İşaretleyiciler ve Bitki Biyoteknolojisi. " Google Kitapları. N. s., n. d. Ağ. 28 Mart 2017

3. Pazartesi, 8 Nisan 2013 Tweet. "The Magic's Membrane: Best Western Blot Sonuçları İçin Akıllıca Seçin. "Biocompare. N. s., 08 Nisan 2013. Web. 28 Mart 2017